Axel Semrau®
Mit uns stimmt die Chemie ...
Zum "Front End" eines LCMS-Systems gehört neben einem leistungsfähigen Probengeber in erster Linie ein auf die Applikation abgestimmtes Pumpensystem. Optimal ergänzt wird eine solche Kombination durch ausgereifte Möglichkeiten zum Samplehandling, wie z.B. zur On-Line Probenvorbereitung, und/oder der nötige Hardware zur mehrdimensionalen Chromatographie bzw. Fraktionssammlung.
Beispielhaft stellen wir hier einige Front-End-Systemlösungen vor, die Ihren MS-Detektor zum optimalen "High End"-LCMS-System ergänzen. Lassen Sie sich dabei von den Attributen leiten, die für Ihre Analytik wichtig sind.
Wenn Sie Ihre Analysenzeit so kurz wie möglich halten wollen oder hohen Probendurchsatz erreichen müssen ("Fast-LC"), können Sie Trennsäulen mit kleinerer Partikelgröße oder mit kleinerem Säulendurchmesser verwenden.
Die Verwendung von Säulen mit kleinerem Partikeldurchmesser führt zu einer höheren chromatographischen Auflösung. Bei sonst gleichen Säulendimensionen (Länge, ID) resultiert aber auch ein größerer Rückdruck, welcher eine besondere Instrumentierung erfordert. Andererseits ist die van-Deemter-Kurve für Partikelgrößen < 2 µm praktisch flach (siehe Abbildung), d.h. die Trennleistung wird unabhängig von der Flussrate. Durch eine Erhöhung der Flussrate erhält man kürzere Retentionszeiten und erreicht so höheren Durchsatz. Zudem werden durch Verkleinerung der Retentionszeiten die Peakbreiten niedriger, die Peaks somit schärfer und höher. Das Signal/Rausch-Verhältnis steigt also und Ihre Messung ist empfindlicher. Stichwort für diese Technologie: UHPLC (Ultra High Performance Liquid Chromatography)!
Auf UHPLC-Bedingungen kann jeder Probengeber angepasst werden, jedoch ist ein Pumpensystem erforderlich, dass den gewünschten Fluss auch bis 1000 bar Rückdruck pulsationsfrei fördern kann. Ideal geeignet hierfür ist das Flux Rheos Allegro-Pumpensystem.
Höhere Empfindlichkeit können Sie erzielen, indem Sie den Säulendurchmesser bei gleich bleibender Partikelgröße des Packungsmaterials verringern. Bei gleicher chromatographischer Auflösung sinkt so zudem der Verbrauch an eingesetzten Lösungsmitteln. Auf die Anforderungen von 0.3 mm ID Säulen exakt abgestimmt ist das expressLC-100-System von Eksigent.
Eine ideale Kombination für Auflösung und Empfindlichkeit stellt das ExpressHT-Ultra-System von Eksigent dar: es ist vom Flussratenbereich auf 1.0 mm ID Säulen abgestimmt und gleichzeitig in der Lage, mit einem Rückdruck von bis zu 10.000 psi zu arbeiten - und das absolut pulsationsfrei durch das für Eksigent typische Spritzenpumpenkonzept.
Maximale Flexibilität eines Systems lässt sich erreichen, indem Pumpen mit einem weiten Flussraten- bzw. Druckbereich ausgewählt werden. Dazu kommt ein Probengeber, der jederzeit erweitert werden kann und so mit Ihren Aufgaben wächst.
Die Reproduzierbarkeit eines Systems hängt sowohl von der Qualität der Injektion wie auch von der Präzision des Pumpensystems ab. Eine Quelle für schlechte Reproduzierbarkeit sind passive Flusssplitter, die vom Säulenrückdruck abhängig sind und daher nicht reproduzierbar arbeiten. Wir bieten daher ausschließlich Pumpensysteme an, die auf die gewünschte Flussrate abgestimmt sind oder die über geregelte und kontrollierte Flusssplitter verfügen.
Beim Autosampler ist neben Verschleppungsfreiheit und hohem Probendurchsatz Flexibilität ein Hauptattribut. Allen diesen Eigenschaften werden Probengeber der CTC PAL Familie gerecht.
Das Routinemodell, der HTC PAL, kann gekühlte Proben von bis zu 24 Multititerplatten oder 12 Deepwellplatten (DWP) abarbeiten. Zusätzlich können bis zu drei Ventile angesteuert werden: so lassen sich z.B. die Injektion und mittels Schaltventilen auch für komplexe chromatographische Aufgaben wie die Beladung von Trap-Säulen und deren Rückspülung vornehmen.
Der flexiblere HTS PAL kann nicht nur bis zu 24 Multititerplatten oder 18 Deepwellplatten aufnehmen, er bietet auch die Möglichkeit, mittels des optionalen Dilutors Verdünnungen und Derivatisierungen automatisch zu pipettieren. Zusätzlich zu den Möglichkeiten des HTC-Pals kann mittels eines speziellen Säulenselektorventils auch aus verschiedenen Trennsäulen ausgewählt werden.
Für ein noch größeres Probenaufkommen ist der HTX PAL geeignet, der neben allen Funktionen des HTS PAL Kapazität für bis zu 24 DWPs bietet.
Allen Probengebern dieser Gerätefamilie ist gemeinsam, dass durch optionale Zusatzmodule die Voraussetzungen geschaffen werden können, um eine besonders intensive Ventilspülung zu gewährleisten und so Carry-Over-Effekte zu reduzieren (X-fast Spül-Station).
Der Betrieb bei hohem Druck (UHPLC-Modus) erfordert bei sonst unveränderter Konfiguration und uneingeschränkten Optionen lediglich ein spezielles Injektionsventil. Bereits bestehende Autosampler können damit jederzeit einfach nachgerüstet werden.
Die wichtigsten Parameter für ein optimal auf die Applikation abgestimmtes Pumpensystem sind die Flussrate bzw. der Flussratenbereich und der zu erwartende Rückdruck. Beide Werte hängen von den Säulenparametern Durchmesser und Partikelgröße ab.
Für einen weiten Flussratenbereich und damit für hohe Flexibilität ausgelegt ist die Flux Rheos 2200 Pumpenfamilie, die es ermöglicht, Flussraten von 10 - 1.500 μl/min extrem reproduzierbar und pulsationsfrei zu fördern. Dies deckt den Standard-Flussratenbereich für Säulen mit den Durchmessern 1.0 mm und 2.1 mm ab. Mit Hilfe eines aktiven Splitters kann der Säulenfluss auf bs zu 0.1 µl/min abgesenkt werden - ideal für 0.3 mm Säulen. Die Pumpen sind sowohl für den isokratischen Betrieb wie auch für binäre, ternäre und quarternäre Gradientenformation erhältlich, mit optimal abgestimmtem Degasser und optional mit einem 10-Port-Schaltventil ausgestattet.
Die Flux Rheos Allegro UHPLC-Pumpe kann ebenfalls den Flussratenbereich für 0.3, 1.0 und 2.1 mm-Säulen abdecken, jedoch dank optimierter Kinematik auch im UHPLC-Betrieb bis 1000 bar (14500 psi). Dies ermöglicht den Einsatz von Partikeln mit weniger als 2 µm Durchmesser in den Trennsäulen mit extrem hoher chromatographischer Auflösung. Auch dieses Pumpensystem ist als Hoch- und Niederdruckgradientensystem erhältlich und perfektioniert mit sonst unerreicht kleinem Totvolumen: 70 µl (Niederdruckgradientensystem) bzw. 18 µl (einschl. Mixer, Hochdruckgradientensystem)!
Ein perfekt auf 0.3 mm Trennsäulen abgestimmtes komplettes HPLC-System ist die neu konzipierte expressLC-100 von Eksigent Technologies. Kombiniert wurde hier ein binäres druckluftgetriebenes (und damit absolut pulsationsfreies) Spritzenpumpenprinzip mit einem zeitgesteuerten Injektionsventil, welches die Injektion kleinster Probenmengen (10 nl) ermöglicht, und einem CCD-DAD-Detektor mit speziell gefertigter Messzelle.
Für 1.0 mm Trennsäulen mit kleinen Partikeln ist das ExpressHT-Ultra-System von Eksigent optimal. Es vereint die Vorteile des pulsationsfreien Spritzenpumpenprinzips mit den Notwendigkeiten des hohen Pumpendrucks für UHPLC-Anwendungen. Extrem schnelle Chromatographie mit scharfen, hohen Peaks garatieren höchste Empfindlichkeit und unerreichten Probendurchsatz.
Wir bieten Ihnen optimal auf Ihre Anforderungen abgestimmte Systempakete mit allen angesprochenen Probengeber- und Pumpenvarianten. Warum sollten Sie mit weniger zufrieden sein? Hier sehen Sie nur einige Beispiele aufgeführt - sprechen Sie uns an für individuelle Lösungen!
Hochdurchsatz UHPLC Hochdruck-Gradientensystem:
Flux-Rheos-Allegro mit CTC HTS PAL für die Kombination mit einem beliebigen LCMS-Detektor
Optimal z.B. für DMPK-, ADME-Applikationen auf 2.1 mm Säulen mit 1.9 µm Partikeln
Binäres Gradientensystem für minimales Probenvolumen auf 0.3 mm Säulen:
Eksigent expressLC-100 mit CTC HTC PAL, DAD-Detektor
Optimal z.B. für Peptidmapping, schnelle HPLC-Anwendungen mit extrem kleinen Retentionszeiten
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| Produkt-Information Front-End-Systeme |
| Axel Semrau GmbH & Co. KG | |||||||||
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